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    如何选择更适合的生化试剂盒
    点击次数:192 发布时间:2018-07-02

    体外诊断试剂(in vitro diagnosis regengts)是用于完成一个特定体外诊断检验,而包装在一起的一组组分。试剂盒组分包括抗体、酶、缓冲液、稀释液、校准物、控制物或其它物品和材料。随着新技术、新项目的快速发展,与之相匹配的生化试剂盒也进入临床实验室。那么在开展新实验前,面对多种试剂盒,爱博体育lovebet该如何选择合格有效、适合本实验室的试剂盒呢?

    通常生化试剂盒可分为液体单试剂和液体双试剂,前者特别适用于半自动生化分析仪和小型自动生化分析仪,使用方便,缺点是稳定性较差。与单试剂相比,双试剂提高了抗干扰能力,具有稳定性能较好,可消除样品自身空白等特点。此外还有多项同测组合试剂、浓缩试剂等。

     

     

    一、试剂空白吸光度

    用蒸馏水做空白,用指定的空白液加入试剂作为样品测试,在测试主波长下,记录测试启动时的吸光度(A1)和约5分钟后的吸光度(A2),A2测试结果即为试剂空白吸光度测定值,应符合生产爱博体育lovebet给定范围。这是判定试剂质量的一个有效指标。

    二、试剂空白变化速率

    对于速率法试剂盒,用指定的空白液加入试剂作为样品测试时,在测试主波长下,记录测试启动时的吸光度(A1)和约5分钟(T)后的吸光度(A2),计算试剂空白吸光度变化率(DA/min),应不超过生产爱博体育lovebet给定值。测定试剂空白吸光度变化(ΔA/min),用来检查试剂在工作状态下的稳定性。但事实上,试剂空白吸光度变化速率无法反映试剂盒的稳定性,试剂空白吸光度变化速率主要反映干扰程度和仪器的稳定性。

    三、分析灵敏度

    用吸光度差值(ΔA)或吸光度变化(ΔA/min)来表示单位浓度的被测物反应所引起的信号变化,其含义类似摩尔消光系数,应符合生产爱博体育lovebet给定范围。需要注意的是,分析灵敏度不是越高越好,以适合待测物检测范围为原则。分析灵敏度一般用于批间比较,较能反映制造商的配方、原料的一致性。

    四、线性范围

    取高浓度样品和低浓度样品按不同比例混合成5个浓度做线性试验。线性范围内的分析性能应符合如下要求:①线性性相关系数r应≥0.990;②线性偏差应不超过生产爱博体育lovebet给定值。试剂(盒)的线性范围越宽,临床复测几率越小,但与样品/试剂比例成反比。

    五、重复性

    1. 批内重复性 在重复性条件下,用高、中、低三个水平浓度(高、低浓度应超过参考区间20%~30%,中浓度水平在参考区间之内)的控制血清或新鲜人血清测试试剂,重复测试至少10次。

    2. 批间重复性 用质量控制血清测试3×3(3个批号,每个批号取3瓶)批间差,较能反映制造商的配方、原料的一致性。干粉或冻干试剂还需测定批内瓶间差,测定同一批号的试剂20瓶,用变异系数(CV)来表示。变异系数(CV)不超过生产爱博体育lovebet给定值。

    六、准确度

    1. 相对偏差 直接用试剂盒测定参考物质(平行3次),评价测定均值与靶值的偏离程度。也可用由参考方法定值的高、中、低三个浓度的人混合血清,用试剂盒平行测定3次,计算均值与定值的相对偏差。

    2. 比对试验 既无参考物质、参考血清,也无标准品,也可用比对试验来验证准确度。

    七、校准品溯源、质控品赋值

    1. 校准品溯源性 根据GB/T21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容,明确溯源途径。

    2. 质控品赋值有效性 质控品的测定结果应在试剂盒规定的范围内。

    八、稳定性

    1. 效期稳定性 取已到效期的试剂盒按以上评价方法对试剂盒性能指标进行评价。

    2. 热稳定性试验 生化试剂盒一般置2-8℃保存,为了快速有效地评价试剂盒的稳定性,可以用加速试验来估计。

    3. 开瓶稳定性 干粉试剂开瓶后(复溶后)在规定的储存条件下保存至预期时间内,产品的性能至少应符合线性和准确度的要求。

     


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